Consegna mirata di un PD

BMC Medicine volume 21, numero articolo: 327 (2023) Citare questo articolo

Dettagli sulle metriche

Il CD133 è considerato un marcatore delle cellule staminali tumorali (CSC) in diversi tipi di tumori, compreso il carcinoma epatocellulare (HCC). Le cellule T chimeriche specifiche per il recettore dell'antigene (CAR-T) che mirano alle CSC CD133-positive sono emerse come strumento per il trattamento clinico dell'HCC, ma l'immunogenicità, l'alto costo dei vettori virali ricombinanti di grado clinico e la potenziale mutagenesi inserzionale limitano la loro applicazione clinica .

Le cellule CAR-T specifiche per CD133 che secernono scFv bloccanti PD-1 (cellule CAR-T CD133 e PD-1 s) sono state costruite utilizzando un sistema di trasposoni della bella addormentata dalla tecnologia minicircle e l'efficacia antitumorale di CAR-T CD133 e PD-1 Le cellule di s sono state analizzate in vitro e in vivo.

Un'analisi univariata ha mostrato che l'espressione di CD133 nei pazienti maschi allo stadio avanzato (II e III) era significativamente associata a una peggiore sopravvivenza libera da progressione (PFS) (P = 0,0057) e sopravvivenza globale (OS) (P = 0,015), e una l'analisi multivariata ha mostrato una tendenza verso un'OS peggiore (P = 0,041). I pazienti maschi con HCC avanzato hanno mostrato un punteggio positivo combinato (CPS) PD-L1 circa 20 volte più alto rispetto a quelli con HCC in stadio iniziale. Abbiamo generato con successo cellule CD133 CAR-T e PD-1 che potrebbero secernere scFv che blocca PD-1 sulla base di un sistema della Bella Addormentata che coinvolge vettori minicircolari. Le cellule CD133 CAR-T e PD-1 hanno mostrato una significativa attività antitumorale contro l'HCC in vitro e in modelli murini di xenotrapianto. Pertanto, le cellule CD133 CAR-T e PD-1 possono essere una strategia terapeuticamente trattabile per colpire le CSC CD133 positive nei pazienti maschi con HCC avanzato.

Il nostro studio fornisce una strategia non virale per costruire cellule CAR-T che potrebbero anche secernere inibitori del blocco del checkpoint basati su un sistema della Bella Addormentata da vettori minicircolo e ha rivelato un potenziale beneficio di questa strategia per i pazienti di sesso maschile con HCC avanzato ed elevata espressione di CD133 (punteggio immunoistochimico mediano > 2.284).

Rapporti di peer review

Il carcinoma epatocellulare (HCC) è il tumore maligno primario del fegato più comune e la terza causa di morte correlata al cancro in tutto il mondo [1]. Nonostante la valutazione di molte chemioterapie e agenti terapeutici mirati, gli unici trattamenti provati per la malattia avanzata sono sorafenib, regorafenib e lenvatinib, e i benefici in termini di sopravvivenza globale sono modesti [2]. Recentemente, due inibitori programmati della proteina 1 della morte cellulare (PD-1), pembrolizumab [3] e nivolumab [4], sono stati approvati per il trattamento dell'HCC in pazienti che hanno manifestato progressione dopo l'assunzione di sorafenib, ma anche i loro tassi di risposta (circa il 20%) erano bassi. insoddisfacente [5]. Pertanto, è urgentemente necessaria una nuova strategia di trattamento che migliori i benefici clinici per l’HCC.

Le recidive e le metastasi sono eventi frequenti e attesi dopo la terapia sistemica nei pazienti trattati con gli attuali trattamenti per l'HCC avanzato. Prove emergenti suggeriscono che la maggior parte delle terapie sistemiche possono solo ridurre il carico del tumore primario perché le cellule staminali tumorali (CSC) possiedono meccanismi intrinseci per resistere alla terapia tradizionale o nuova, e le CSC a riposo sono responsabili dell’iniziazione, della recidiva e delle metastasi del tumore [6, 7]. Insieme alla presenza di cellule simili a cellule staminali HCC CD133-positive [8], un numero crescente di studi indica che l'espressione di CD133 è correlata con tumori in stadio più elevato e prognosi sfavorevole nei pazienti con HCC [9, 10], suggerendo una strategia promettente di utilizzando CD133 come bersaglio per il trattamento dell'HCC. Le cellule T specifiche del recettore dell'antigene chimerico (CAR-T) che mirano alle CSC CD133-positive sono emerse come strumento per il trattamento clinico dell'HCC (NCT02541370).

La terapia immunitaria per i tumori basata sulle cellule CAR-T si basa sull’integrazione stabile di un transgene nel genoma dell’ospite in modo che la progenie geneticamente modificata infusa possa fornire effetti terapeutici a lungo termine. Ad oggi, la maggior parte delle terapie con cellule CAR-T sono prodotte tramite sistemi di vettori virali tradizionali che sono stati ampiamente e in modo sicuro utilizzati per inserire transgeni nelle cellule T, ma l’immunogenicità, l’alto costo dei vettori virali ricombinanti di grado clinico e il potenziale di mutagenesi inserzionale limitano la loro applicazione clinica [11, 12]. I sistemi di trasferimento genico non virale rappresentano alternative interessanti agli attuali metodi per la produzione di cellule CAR-T. Le alternative più comuni ai vettori virali sono i trasposoni. Sono stati segnalati una varietà di sistemi basati su trasposoni per la produzione di cellule CAR-T e questi sistemi forniscono una minore immunogenicità, profili di sicurezza migliorati e costi ridotti per la produzione GMP di cellule CAR-T. Tra le tecnologie disponibili attualmente in fase di sperimentazione clinica, il sistema di trasposoni della Bella Addormentata (SB) ha sperimentato lo sviluppo più rapido dall’inizio all’applicazione negli esseri umani [13]. I minicerchi (MC) sono vettori di DNA superavvolto che costituiscono una nuova alternativa ai plasmidi come fonti di trasposasi e trasposoni SB. Rispetto ai plasmidi convenzionali, gli MC mancano di sequenze backbone batteriche e di geni di resistenza agli antibiotici, risultando in livelli più stabili e più elevati di espressione genica transitoria quando trasfettati in cellule di mammifero [14, 15].